肉的宰后嫩化主要的归因于肌原钎维组成的毁掉，肌原钎维组成是由内源性核核核血清核核血清质油脂水解酶光化学降解肌原钎维和神经体肿瘤组织細胞骨架核核核血清发生的。与几十块年来时不时是重视聚焦的钙核核核血清酶不一，胱天核核核血清酶（caspases）近两天变为感想象力语句题。胱天核核核血清酶在神经体肿瘤组织細胞凋亡的执行工作周期起着至关非常重要的帮助，中仅caspase-3在人死之后核核核血清核核血清质油脂水解中的帮助是多部分面和复杂性的，这样划得来进一次探析分析。S-亚硝基化顺利通过调理钙脱离、能量转换代谢转化、核核核血清质光化学降解和神经体肿瘤组织細胞凋亡来调理肉肥，涉及嫩度和持水特性。事前探析分析察觉到S-亚硝基化也可以变动信任线粒体的caspase-3级联影响，这可能会是腿部肌肉神经体肿瘤组织細胞凋亡和鸡肉产品变动的情况。caspase-3的探析分析重大是其与神经体肿瘤组织細胞凋亡的原因，而是，越来越多有探析分析浅议S-亚硝基化调理caspase-3的机理。

2024年9月由苏州农产品加工本科大学张万刚教援团对在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物工程为该研究提供了亚硝基化装饰组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

2英文微信标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

学术期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202几年影晌成分：5.7

发布时间段：2024年9月

朋友计量单位：南京农业大学

研究分析板材：蛋白

拜谱出具方法：亚硝基化修饰组学

技艺自驾路线：

一、研究探讨最后

01.Caspase-3灵活性

近几年尚不弄清楚NO对caspase-3的减缓效应是不是归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样质量浓度梯度方向的GSNO成为外源性NO供给，以成脂caspase-3的身体之外S-亚硝基化。結果表达，与不会GSNO的组相信，100、200和400μM GSNO组的caspase-3特异性正相关降底（图1），与原先曝光同步。GSNO除理降底caspase-3特异性的风险缘由仍亟需阐发。

图1 的不同质量浓度的GSNO正确处理对caspase-3活力性的干扰

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化限度

科学研究方案探讨Caspase-3的亚硝基化方面，以具体分析GSNO对Caspase-3的反應性。经GSNO解决后，验测到caspase-3蛋白质S-亚硝基化标准增长（图2）。哪些最后说明，外源性GSNO培养计划可成功的英文帮助caspase-3的身体外S-亚硝基化。令人感动惊叹的是，在不会GSNO出现的较组中验测到两个微亮的S-亚硝基化带，这说明caspase-3已经出现内源性的S-亚硝基化。凡此种种，本科学研究方案探讨中caspase-3的S-亚硝基化方面较高，而caspase-3的抗逆性较低，这与之后的科学研究方案探讨同一。可是，caspase-3的特情人S-亚硝基化呈现位点尚不很明白，还需要进每一步的生命的进化。

图2 GSNO工作对caspase-3S-亚硝基化的水平的应响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化表达组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的回文回文序列。黑色标志的回文回文序列表现S-亚硝基化肽，橘红色标志的C表现S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3生物降解结蛋白酶

结核血清酶酶对于一些更重要性的神经細胞骨架核血清酶酶，在提升肌神经細胞型式的型式完善性和收缩毛孔性这方面起着更重要性影响，研究方案S-亚硝基化caspase-3对结核血清酶酶生物吸附的特别敏各样存在更重要性真正意义。与Std（未用胱天核血清酶酶酶-3和GSNO孵育的原始肌玻纤核血清酶酶）组较之，0 μM GSNO组（肌原玻纤和caspase-3的孵育，无GSNO）的完善结核血清酶酶硫量重要消减，提醒caspase-3对结核血清酶酶存在风险的核血清酶酶核血清质水解效果。在GSNO孵育后，完善结核血清酶酶的硫量严重加入（P < 0.05）。因此，当GSNO渗透压增加时，完善结核血清酶酶的硫量长期上涨（P < 0.05）（图5）。该发掘说明，SNO掩盖的caspase-3以质量信任的具体方法减弱结核血清酶酶的生物吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结球蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3分解肌钙蛋清-T

肌钙核核血清质酶-T (TnT)是原肌球核核血清质酶调理主要负责胸肌缩水的细细的的必备肌原合成玻纤素核核血清质酶。TnT的挥发功能是检查测量到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化条件下，caspase-3对TnT的挥发原因提示6提示，与Std组（不包含caspase-3和GSNO的肌原合成玻纤素）想必，caspase-3组中30 kDa TnT场面同质性加大，表达caspase-3参与到了TnT的挥发，还有就是，caspase-3与GSNO的孵育引发30 kDa TnT下滑。在100和200 μM GSNO组内沒有检查测量到比较明显的对比(P > 0.05)，而当GSNO的渗透压达到了400 μM 时，该场面同质性缩减(P < 0.05)。等等出现 表达了SNO呈现的caspase-3对TnT挥发的缓和使用。结核核血清质酶和TnT是caspase-3的皮肤敏感底物，而GSNO操作减小caspase-3的渗透性或者引发肌原合成玻纤素核核血清质酶挥发的程度减小。结合以上表明，NO成脂的S-亚硝基化不错实现呈现半胱氨酸残基来调理caspase-3的渗透性，必将进这一步危害其对结核核血清质酶和TnT的核核血清质酶溶解工作能力，以此危害牛肉片品格。

图6. S-亚硝基化caspase- 3分解肌钙球蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本科学研究重在探究S-亚硝基化对caspase-3装饰的后果及随即对羊肉肌原植物弹性纤维休外化学降解的后果。血清S-亚硝基化就能够装饰caspase-3的半胱氨酸残基，故而出现caspase-3催化活性减少，进十步促使了其对羊肉肌原植物弹性纤维血清的血清水解反应功能。

三、拜谱个人总结

科研进行了酶活检验，亚硝基化绘制组学定性分析，WB等查重技术手段，发掘血清S-亚硝基化会绘制caspase-3的半胱氨酸残基，这造成 了caspase-3活性酶类的减小，并举步骤抑止了其对牛羊肉肌原植物纤维血清的血清水解反应水平。本科研为表述血清质亚硝基化对肉质地的控制机理供给了一大个新的的视野。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的淀粉酶质组学、淡化淀粉酶质组学、新陈代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列的产品设备，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total脱色重现、矿酸巯基，欢迎大家咨询！

参考资料论文论文参考文献：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663