全球排名气温升高关系农作物产销量并愈演愈烈病虫害。极端原子低温会诱导性草本花卉行成热应激状态反应迟钝，也限制其抗虫技能。但种能够 功效的原子措施仍不指明。

近日，杭州农林综合大学陈学伟讲解团队在Nat. Commun上发表题为“OsCDPK24 and OsCDPK28 phosphorylate heat shock factor OsHSFA4d to orchestrate abiotic and biotic stress responses in rice”的文章。研究揭示了钙依赖蛋白激酶OsCDPK24和OsCDPK28通过磷酸化修饰调控耐热与抗病关键转录因子OsHSFA4d的活性，进而调控水稻耐热性与抗病性的分子机制。拜谱生态学为该研究提供了球蛋白互作组、磷碱化表达位点质谱概述技术服务。

英文音标名字：OsCDPK24 and OsCDPK28 phosphorylate heat shock factor OsHSFA4d to orchestrate abiotic and biotic stress responses in rice（Nat. Commun IF=15.7）

繁体中文各称：OsCDPK24和OsCDPK28通过磷酸化热激转录因子OsHSFA4d来调控水稻的非生物胁迫与生物胁迫响应

大家的单位：四川农业大学

调查原料：胶条

拜谱提拱技术设备：蛋清互作组、磷碱化绘制位点质谱定量分析

的技术风格：

学习但是

1.OsHsfA4d促使谷子种植耐低温性，调节谷子种植抗病力性

在非菌物与菌物胁迫为了响应时候中，大量OsHsfs核蛋白的表达方式品质再次发生转换，在当中OsHsfA4d的RNA品质在对付温度高作业及病毒支原体许多种病源体时体现出最厉害的引发做用（图1a）。利用RT-qPCR完成核验（图1b-c）。温度高作业胁迫和病源病毒支原体等实验室分析方法介绍信：稻子OsHSFA4d双向控制耐温性但负向控制抵抗性（图1d-f）。

图1 OsHsfA4d促使稻子种植耐热性性，促使稻子种植身体性

2.OsHSFA4d进行推动HSP101把你想表达出来提升草本花卉耐温性，且与抗虫性没有什么关系

OsHSFA4d蛋白质在稻子组织细胞膜核与组织细胞膜质设一有数据分布（图2a)，抗体荧光测试介绍信文件表示OsHSFA4d看做转录缴活指数公式可以很好缴活LUC统计表观遗传抒发（图2b-c）。能够 DNA亲和纯化测序（DAP-seq）枝术挑选稻子OsHSFA4d的204个大概待选靶表观遗传，包扩HSP101在其中的14个表观遗传已被确认参与到稻子热应激性，进三步的RT-qPCR研究呈现，OsHSFA4d敲除植物中HSP101的RNA能力正相关影响，而OsHSFA4d过抒发植物中该表观遗传RNA能力则突出变高，其他的书14个大概表观遗传均未出来突出变化规律（图2d）。高温度胁迫和病源病毒感染等处置测试定量分析介绍信文件：OsHSFA4d能够 可以淡化HSP101抒发来加强稻子耐熱性，且该做用独立的于抗病力性（图2e-l）。

图2 OsHSFA4d依据力促HSP101表达方式增強草本植物耐温性，且与身体性没有什么关系

3.OsHSFA4d加快CslF6的表达方式，以限制作物抵抗性

RT-qPCR没想到彰显，OsHSFA4d敲除主茎中CslF6的RNA横向减轻，而OsHSFA4d过体现主茎中该DNA横向提高，任意15个DNA的RNA横向未受的影响，并顺利借助双荧光素酶生物判断等工作报告核实其控制直接关系（图3a-c）。温度胁迫和副猪嗜血杆菌感动等除理工作报告定量分析證明：OsHSFA4d顺利借助加快CslF6体现来负向控制直播稻抵抗性，且该用机制化不依懒于耐高温性（图3d-j）。

图3 OsHSFA4d提高CslF6的把你想表达出来，以抑制性绿植的抵抗性

4.OsHSFA4d与激酶OsCDPK24和OsCDPK28共同效果生成混合物

GST-OsHSFA4d与水稻总蛋白共同孵育，pull-down的蛋白进行蛋白质互作类物质析，鉴定到OsMKK4、OsCDPK24和OsCDPK28等激酶（图4a），在后续的荧光素酶互补成像（LCI）分析、免疫共沉淀（Co-IP）实验等验证了OsHSFA4d与激酶OsCDPK24和OsCDPK28相互作用关系，并形成一个蛋白复合体（图4b-g）。

图4 OsHSFA4d与激酶OsCDPK24和OsCDPK28相护用处出现结合物

5.热应激反应诱惑OsCDPK24/28介导OsHSFA4d的S146磷酸性反应

体外磷酸化实验显示，GST-OsHSFA4d可分别被MBP-HA-OsCDPK24和MBP-HA-OsCDPK28单独磷酸化。磷碱化表达位点质谱分析发现，其中有四个位于OsHSFA4d高度保守功能域的残基（S71、S146、S209和T405）被鉴定出磷酸化修饰（图5a-f）。点突变试验表明OsCDPK24和OsCDPK28主要在寡聚化结构域的S146位点磷酸化OsHSFA4d，以协调耐热性和抗病性（图5g-j）。

图5 热应激状态诱导性OsCDPK24/28介导OsHSFA4d的S146磷酸性反应

原创文章工作小结

本分析探讨会发现热应激状态凭借提高OsCDPK24/28激酶活性酶类，促成OsHSFA4d在S146位点磷过酸，为了促使HSP101理解以提升直播稻耐高温性，也能够抑制CslF6理解以调低抗虫性程度（图6）。该分析探讨不仅仅积极推进了对大田作物非生物技术体与生物技术体胁迫对答间上下级调节意义的掌握，也为扶植兼有耐高温与抗虫性性的大田作物新产优良品种打下了很重要大分子地基。

图6 水稻种植OsCDPK24/28-OsHSFA4d-HSP101/CslF6系统图

拜谱工作小结

本研究揭示了水稻中OsCDPK24和OsCDPK28通过磷酸化热激转录因子OsHSFA4d的S146位点，调控水稻非生物胁迫（热胁迫）与生物胁迫（病害）响应的权衡机制，为培育兼具耐热性和抗病性的水稻品种提供了分子基础。拜谱海洋生物为该研究提供蛋清互作组、磷硝化作用表达位点质谱定量分析服务。拜谱海洋生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋白酶质组学、遮盖蛋白酶质组学、新陈代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表，欢迎致电咨询！

可以参考资料：

Fang Y, Liao H, Wei Y, et al. OsCDPK24 and OsCDPK28 phosphorylate heat shock factor OsHSFA4d to orchestrate abiotic and biotic stress responses in rice. Nat Commun. 2025;16(1):6485. Published 2025 Jul 14. doi:10.1038/s41467-025-61827-